El equipo de Ai Wanghui inventó una nueva tecnología que puede convertir un sensor de proteína fluorescente verde en un sensor fluorescente rojo.
Los biosensores basados en proteínas fluorescentes son herramientas de investigación esenciales. Aunque en los últimos años los científicos han desarrollado biosensores individuales basados en proteínas fluorescentes rojas, las longitudes de onda de emisión de la mayoría de los biosensores de proteínas fluorescentes existentes se encuentran en la región espectral verde o amarilla. Su superposición espectral dificulta la realización de la monitorización de fluorescencia de doble canal. Además, se espera que los biosensores de proteínas fluorescentes rojas reduzcan la fototoxicidad y la autofluorescencia y aumenten la penetración de los fotones y la profundidad de las imágenes. Sin embargo, los biosensores de proteínas fluorescentes rojas existentes suelen tener un rango dinámico pequeño, son propensos a la agregación en las células y sufren problemas como la conversión de luz. Por lo tanto, las sondas fluorescentes rojas existentes suelen ser menos funcionales que sus correspondientes versiones fluorescentes verdes. Por lo tanto, el desarrollo de sensores de fluorescencia roja con mejores funciones se ha convertido en un punto de investigación en el campo del desarrollo de la fluorescencia.
En comparación con los métodos tradicionales de evolución dirigida, la tecnología de extensión del código genético es una herramienta eficaz para la evolución dirigida de proteínas. Esta tecnología puede insertar aminoácidos no naturales en la proteína objetivo en puntos específicos y luego cambiar las propiedades físicas y químicas originales de la proteína objetivo. El 6 de septiembre de 2020, 5438+04, el grupo de investigación de Hui en la Universidad de Virginia publicó un artículo "Estrategias generales para proteínas fluorescentes verdes desplazadas al rojo" en "Nature Chemical Biology". En el artículo basado en biosensores, se insertó 3-aminotirosina (aY) en la posición del residuo de tirosina de los cromóforos de proteínas fluorescentes verde, amarillo y cian, y la emisión de fluorescencia original se desplazó al rojo en casi 100 nm. El equipo de investigación aplicó además esta tecnología a una variedad de biosensores de proteínas fluorescentes amarillas y verdes para cambiar su fluorescencia al rojo y reducir su fototoxicidad, logrando un monitoreo simultáneo de múltiples canales de fluorescencia y múltiples detectores.
Información del equipo de investigación:/Artículos/s 41589-020-0641-7
Productor: Eleven