Hable sobre sonidos cerebrales: la influencia de Gongfen en los indicadores de comportamiento en el comportamiento experimental de campo abierto de ratones

La prueba de campo abierto es un experimento clásico de comportamiento animal que a menudo se utiliza para evaluar comportamientos similares a la ansiedad en roedores. Hay muchas causas de ansiedad en los roedores, como dolor crónico, estrés de los depredadores, drogas, enfermedades, etc. Los roedores temen estar expuestos en áreas abiertas durante largos períodos de tiempo debido al miedo a los depredadores naturales. Al mismo tiempo, explorarán activamente nuevos entornos para encontrar comida, acompañados de la curiosidad. El experimento en campo abierto estudia el comportamiento ansioso de los animales bajo el conflicto psicológico de "vigilancia-curiosidad" imitando este nuevo entorno abierto. Los parámetros experimentales importantes comúnmente utilizados para evaluar las conductas de ansiedad de los animales incluyen: distancia de movimiento en el área central de un campo abierto, número de entradas, tiempo de actividad, número de defecaciones de pie, etc. Entre ellos, la definición de la zona central es un parámetro clave para medir el nivel de ansiedad del animal. Sin embargo, la delimitación del tamaño de la región central es diferente en los diferentes informes bibliográficos. Gould et al. sugieren que el tamaño del área central debe fijarse entre 25 y 50 del área total del área abierta. Si el área central es demasiado grande o demasiado pequeña, puede dar lugar a resultados estadísticos anormales. No hay consenso sobre cuán apropiada debería ser la zona central.

¿Dispositivo conductual?

El equipo de experimento de campo y el sistema de recopilación y almacenamiento de videos utilizan Shanghai Xinruan Information Technology Co., Ltd. y el software de análisis de comportamiento animal VisuTrack.

¿Construcción de maquetas?

Modelo de ansiedad animal inducida por dolor inflamatorio. Se anestesiaron ratones de tipo salvaje con 3 isoflurano durante un breve periodo de tiempo y luego se inyectaron por vía subcutánea 10 µl de CFA en la planta de la extremidad trasera derecha del ratón. Después de la inyección, vuelva a colocar suavemente el ratón en la canasta y obsérvelo continuamente durante 3 a 5 minutos después de despertarse. Si la rata muestra un comportamiento de lamer o morder, el modelo experimental tiene éxito. Una vez establecido con éxito el modelo, los ratones se dividieron en grupos y se alojaron en jaulas separadas.

Prueba de experimento en campo abierto

Los experimentos en campo abierto se realizarán en todos los ratones después de las 18:00 todos los días. El grupo modelo animal con ansiedad inducida por dolor inflamatorio (n = 10) se llevó a cabo el día 14 después del establecimiento exitoso del dolor inflamatorio plantar; a los ratones en el grupo modelo de ansiedad se les inyectó intraperitonealmente FG7142 durante 1 hora y luego se les indujo anti-ansiedad; medicamentos para la ansiedad (n = 10); en estado natural, los ratones de control (n = 10) podrían tratarse directamente. Tres días antes del experimento, los ratones que se iban a probar fueron trasladados a la zona de espera para adaptarse al nuevo entorno, y cada ratón fue reconfortado para reducir las reacciones de estrés ambiental y artificial. El brillo del sitio experimental es de 80 ~ 120 lux, la humedad es adecuada y la temperatura se mantiene a (24 ± 0,5) ℃. Al comienzo del experimento formal, el ratón se colocó en el centro del dispositivo experimental de campo abierto (una caja de plástico cúbica con un largo, ancho y alto de 50 cm × 50 cm × 50 cm), y se mostró el video del comportamiento animal. Se utilizó un sistema de captura para registrar el comportamiento del ratón en campo abierto con una trayectoria de movimiento de 5 minutos en el dispositivo experimental. Después del experimento, cada ratón se colocó en una jaula nueva y las heces y la orina en el dispositivo de campo abierto se limpiaron con alcohol al 75% para eliminar los olores residuales. Una vez que el dispositivo esté completamente seco, continúe con el siguiente experimento con el ratón. Durante todo el experimento, el experimentador se mantuvo en silencio y grabó en video todo el experimento fuera del área experimental (el área experimental estaba bloqueada por una cortina colgante) para evitar que el propio olor del experimentador estresara a los ratones y afectara los resultados experimentales. Después de todos los experimentos, todos los ratones fueron trasladados nuevamente a sus jaulas originales para descansar.

Caja de experimentos de campo con ratas y ratones, modelo: XR-XZ301, Shanghai Xinrong, software de análisis de comportamiento animal VisuTrack.

¿Análisis de datos?

Debido a que el área abierta desconocida en el área abierta es una amenaza natural para las ratas. Después de ser colocadas en el área central, las ratas escaparán rápidamente a las áreas exteriores del área abierta y se moverán hacia la pared. ponemos El momento en que el mouse toca las cuatro paredes fuera del área abierta se establece como el momento para comenzar a registrar la trayectoria de movimiento del mouse. Todos los análisis de comportamiento del mouse comienzan de acuerdo con este estándar. Utilice software de análisis de comportamiento para recopilar parámetros como la distancia de movimiento del mouse, el tiempo de actividad, la cantidad de entradas, la latencia y la velocidad de movimiento.

Usando el método de división de cinco zonas para analizar y comparar los patrones de comportamiento de diferentes animales modelo de ansiedad en la naturaleza

El experimento de campo abierto consiste en analizar la exploración de ratones en un entorno abierto. y área abierta en unos pocos minutos, este comportamiento exploratorio a menudo se ve afectado por cambios en el estado de ánimo de los ratones. En circunstancias normales, el experimentador utiliza el sistema de análisis y recopilación de videos (Figura 1A) para comparar la distancia de movimiento, el tiempo de actividad y la distancia de movimiento de los ratones en el área central (que representa 25 ~ 50 del área total de el área abierta) por unidad de tiempo, para juzgar el objeto de la investigación. ¿Está presente un comportamiento similar a la ansiedad? Aquí, para comparar los patrones de comportamiento de diferentes tipos de modelos de ansiedad de ratones en campo abierto, no configuramos un área central, sino que dividimos todo el campo abierto en 100 áreas cuadradas pequeñas con un tamaño de 5 cm × 5 cm. Análisis de comportamiento El software etiqueta automáticamente cada área cuadrada pequeña con un número correspondiente (Figura 1b). Definimos el área abierta desde la periferia al centro como área A/B/C/D/E5 (Figura 1C): área A (anillo cuadrado blanco más externo), área B (anillo cuadrado negro), área C (anillo cuadrado azul ), área D (anillo cuadrado amarillo), área E (anillo cuadrado rojo). Dado que el área de cada cuadrado pequeño es pequeña y el cuerpo del mouse es largo, para garantizar la precisión del seguimiento de la trayectoria, adoptamos un método de seguimiento de un punto, es decir, solo rastreamos los cambios de posición de la cabeza del mouse en el cuadrado pequeño (Figura 1d). Entre estas cinco áreas, el área B/C/D tiene su propia área contigua de doble cara, mientras que el área A/E solo tiene un área contigua de una sola cara, por lo que las estadísticas del área A/E y B/C /D son diferentes (Figura 1e).

El principio de diseño de los experimentos de campo es simular áreas abiertas desconocidas en el entorno natural. Como no hay lugar donde esconderse de los depredadores, las ratas que operan en áreas tan abiertas son una amenaza, a menudo acompañada de miedo. Las ratas, por otro lado, necesitan explorar áreas abiertas debido a sus instintos de búsqueda de alimento o simplemente a su naturaleza “curiosa”. Cuando las ratas estaban presentes en el área central del campo abierto, estas dos emociones chocaron, lo que provocó que las ratas exhibieran un comportamiento similar a la ansiedad.

Referencia del artículo: doi: 10.16557/j CNKI 1000-7547.2019.

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