¿Qué es la superóxido dismutasa activa y cómo se produce artificialmente?

Prefacio

El nombre chino de SOD es superóxido dismutasa y su nombre en inglés es superóxido dismutasa. Su peso molecular (glóbulos rojos bovinos) es de unos 32.000 y es una metaloproteasa ampliamente presente en los organismos vivos. Sus alias incluyen: orgoteína, ormeteína, ontoseína; superóxido dismutasa de zinc medida en metros cúbicos; la SOD es aclamada por los científicos como la enzima medicinal más prometedora del siglo XXI.

1. Este proceso es una metaloenzima aislada de glóbulos rojos, hígado y otros tejidos de mamíferos, contiene dos subunidades, cada subunidad contiene un átomo de cobre y un átomo de zinc; La superóxido dismutasa cataliza la dismutación del oxígeno en H2O y oxígeno. Sus propiedades dependen no sólo de la proteína enzimática sino también de los iones metálicos en el sitio activo. Según el tipo de iones metálicos, se puede dividir en tres tipos: Cu. Superóxido dismutasa de zinc y superóxido dismutasa de hierro, superóxido dismutasa de manganeso. En circunstancias normales, la SOD es relativamente estable. Diferentes fuentes de zinc en medidas cúbicas. El espectro de absorción UV es ligeramente diferente. Por ejemplo, la SOD de sangre bovina muestra una absorción máxima a 258 nm, mientras que la SOD de sangre de cerdo muestra un pico de absorción máxima a 265 nm. En determinadas condiciones, la actividad enzimática se reducirá o incluso se perderá por completo. Por ejemplo, el cianuro puede inhibir la actividad de la SOD, el peróxido de hidrógeno puede reducir la actividad de la SOD y el cloruro de guanidina puede inhibir significativamente la actividad de la SOD.

2. El uso de SOD se basa principalmente en el hecho de que la SOD es un eliminador de aniones superóxido, y los aniones superóxido (O2~) son sustancias tóxicas en el cuerpo humano que pueden causar una variedad de enfermedades. para que puedan eliminar el proceso inflamatorio. Los iones superóxido producidos en él muestran fuertes efectos antiinflamatorios.

En la industria farmacéutica, la SOD puede tratar diversas enfermedades provocadas por iones superóxido, como diabetes, cataratas, artritis reumatoide, etc. También es un fármaco antiinflamatorio eficaz y tiene propiedades antienvejecimiento, antitumorales, antirradiación y antiautoinmunes. La investigación moderna muestra que la SOD también puede tratar enfermedades refractarias como la hipertensión, la enfermedad coronaria, la colecistitis y el enfisema. Industria química diaria: dado que la SOD tiene el efecto de prevenir el envejecimiento celular y la desintoxicación, agregar SOD a productos industriales como cosméticos y agentes para el cuidado de la piel tiene los efectos de protección solar, eliminación de pecas y suavizado de la piel. Es un aditivo indispensable en la industria cosmética actual, y ha aparecido una gran cantidad de productos en el país y en el extranjero. Industria alimentaria: Agregar SOD a los aditivos alimentarios puede mejorar la nutrición, aliviar la toxicidad y prolongar la vida de las células del cuerpo. Los productos de solución nutritiva de SOD ya están disponibles en China y han pasado la evaluación de expertos relevantes de las instituciones de investigación científica de Shanghai.

3. Las perspectivas de desarrollo de SOD: en la actualidad, solo unas pocas unidades de investigación científica y fábricas de productos farmacéuticos bioquímicos en China están desarrollando este producto, pero cada vez más fabricantes utilizan productos SOD, lo que está lejos de cumplirse. la demanda del mercado. Para fomentar y desarrollar vigorosamente nuevos productos de césped, el Estado los ha incluido en proyectos clave de desarrollo científico y tecnológico, invirtió mucho dinero, logró el éxito y comenzó a transferirlos a la producción empresarial, y las perspectivas del mercado son muy amplias.

Notas: (1) Nuestro centro da una calurosa bienvenida a amigos de todos los ámbitos de la vida para que aprendan en el sitio. Los ingenieros bioquímicos le enseñarán paso a paso, lo que le permitirá dominar esta tecnología lo antes posible en el sitio. operación, orientación y capacitación. (2) Sin el consentimiento de nuestra empresa, este proceso y los datos técnicos no pueden transferirse, copiarse ni venderse a ninguna unidad o individuo. Los infractores serán responsables de conformidad con la ley.

Nueva tecnología de refinación

1. Equipo principal: (1) una centrífuga industrial; (2) 1 juego de baño de agua a temperatura constante (10L-50L) (3); ) ) 1 congelador; (4) 1 batidora; (5) cristalería: vaso de 1000 ml, vaso de 500 ml, 2 vasos de 50 ml, vasos medidores de 50 ml y 500 ml, 1 de cada uno (6) varios cubos de plástico.

Reactivos principales: (pureza industrial) citrato de sodio, ácido cítrico, glucosa, etanol al 90%, cloroformo, acetona, cloruro de sodio, hidrogenofosfato disódico, dihidrogenofosfato de sodio, agua desionizada o agua destilada, gel de glucosa sephadex. G-100, DEAE-celulosa.

3. Preparación de reactivos:

1. Fórmula de anticoagulación: (1) 30g de citrato de sodio, 25g de ácido cítrico, 10g de glucosa y agua por 1l. Generalmente se añade 1 ml (anticoagulante) por cada 7 ml de sangre. (2) Solución de citrato de sodio 40 g/l: 1 litro.

2. Suero fisiológico: (0,9%) añadir 0,9 gramos de cloruro sódico a 91 gramos de agua.

3. Preparación del tampón fosfato: generalmente se mezcla tampón fosfato 0,2 M con pH 7,6 con Na2HPO4. H2O, 35,61 g/L y nah 2 po 4·2h2o 31,21 g/L, agregue 87,0 ml al primero y 13,0 ml al segundo. Si K2HPO4.3H2O es 45,644 g/L, nah 2 po 4·2h2o es 31,21 g. /L, todavía 87,0 ml del anterior

4. Refrigerante: en este proceso se utiliza una temperatura baja de -15 grados. Generalmente se utiliza la siguiente fórmula: 33 gramos de sal más 100 gramos de nieve o hielo picado, la mezcla puede llegar a -21,3 grados.

IV. Flujo del proceso

(1) Además de la hemoglobina

1. Tratamiento de anticoagulación sanguínea: añadirla rápidamente a la sangre fresca de ganado vacuno, equino, y anticoagulante ACD1 porcino, mezclar lentamente y agregar 1 ml o anticoagulante N° 2 por cada 7 ml de sangre.

2. Coloque la sangre anticoagulada en una centrífuga y centrifugue a 3000 r/min durante unos 15-20 minutos. Succione con cuidado el sobrenadante (suero amarillo) con una pajita y deséchelo. Lave los glóbulos rojos inferiores 2-3 veces con 2-3 veces solución salina normal y centrifugue a 3000 r/min 7-3 veces por cada lavado.

3. Agregue un volumen igual de agua desionizada a los glóbulos rojos lavados y revuelva vigorosamente durante 30 minutos para picar las paredes celulares de los glóbulos rojos y filtrar la SOD. Lo mejor es dejarlo reposar durante la noche a 0-4 grados y luego extraer orgánicamente la hemólisis.

4. Luego agregue lentamente 0,2-0,25 veces etanol al 95% preenfriado (-15 grados) y 0,1-0,15 veces cloroformo preenfriado al hemolizado, revuelva durante 10-15 minutos y el original. hemolizado Quedará blando. Luego se centrifugó el filtrado a 2500 rpm durante aproximadamente 65438 ± 0-5 minutos y se retuvo el sobrenadante para descartar el precipitado. En este momento, si el sobrenadante es ligeramente amarillo, se puede filtrar con papel de filtro rápido para obtener una solución enzimática cruda que sea clara, transparente y de color azulado.

(2) Purificación preliminar de la solución enzimática cruda:

1. Extracción con alcohol de acetona: agregue 0,8 veces acetona preenfriada (-65438 ± 05 ℃) a la solución enzimática para generar. Si hay una gran cantidad de precipitado blanco, centrifugar a 3000 r/min durante 2 minutos para recoger el precipitado. El sobrenadante se puede verter directamente sin absorción.

2. Desnaturalización térmica: (eliminar proteínas) preparar un baño a temperatura constante. Durante este proceso, llene el agua con 30 minutos de anticipación, encienda la energía y caliente a 55-60 grados para ahorrar tiempo. Agregue aproximadamente 50 veces la cantidad de precipitación de una solución tampón de fosfato de sodio de 0,2 MPH = 7,6, caliente el baño de agua a 60 grados, 65, 438 + 05 minutos y luego enfríe rápidamente a temperatura ambiente. 30000.000000000005

3. Purificación preliminar de SOD: agregue agua desionizada al precipitado anterior para obtener una solución de SOD con una concentración del 20-30 %, póngala en una botella de muestra, póngala en el liofilizador. e inícielo. El grado de vacío final es de 0,2 a 0,1 Torr y se necesitan entre 1,5 y 2 horas para obtener SOD para cosméticos o alimentos. La actividad específica de este producto es superior a 3000 U/.

(Purificación adicional de SOD:

Los productos de SOD generalmente se procesan mediante cromatografía en columna. Después de la cromatografía en columna, la SOD no tiene moléculas pequeñas ni otras impurezas, y después de la cromatografía es SOD altamente activa Los productos de macromoléculas son más caros y se utilizan principalmente como reactivos bioquímicos y reactivos estándar de laboratorio. Actualmente existen dos tipos de cromatografía en columna de SOD, que se pueden utilizar solas o en combinación, la cromatografía de celulosa DEAE y sefadecxg-100. Cromatografía en gel Sephadex, (2) Disolver el precipitado de acetona SOD desnaturalizada por calor en un tampón de pH 7,6 y NaH2PO4-NaHPO4 0,2 M. Cuando haya impurezas insolubles, centrifugar para eliminar el precipitado y pasar el sobrenadante a través de DEAE-celulosa. Columna de cromatografía sephadsxg-100 (1 × 20 cm o 2,5 × 30 cm), elución en gradiente, el eluyente es PH7,6, 0,2 M, tampón NaH2PO4-NaHPO4, el caudal más bajo se controla a 0,2-0,5 ml/min, lavado y eliminación. la velocidad se controla a 0,5 ml/min.

Notas del verbo (abreviatura del verbo):

1. Determine la temperatura y el tiempo adecuados: aunque la SOD es estable al calor, es mejor utilizar temperaturas más bajas durante la separación y purificación. La temperatura es generalmente de 0 a 10 grados y el tiempo no debe exceder los 3 días.

2. Preste atención al método de extracción y purificación: el uso de solventes orgánicos o calentamiento puede precipitar proteínas de manera efectiva, pero dominar la combinación adecuada de solventes y calentamiento puede lograr los mejores resultados.

6. Método de detección de superóxido dismutasa: test de actividad. Es conveniente utilizar el método de autooxidación con pirogalol. Primero, mida la tasa de autooxidación del pirogalol, luego agregue SOD y mida la tasa de oxidación después de agregar SOD. Según la definición de unidad de actividad enzimática, es decir, la cantidad de enzima que inhibe el 50% de la velocidad de descomposición autooxidativa del pirogalol por minuto en condiciones óptimas se define como una unidad enzimática. El valor de actividad total se puede calcular secuencialmente o su pureza se puede determinar mediante electroforesis en gel de poliacrilamida.

La superóxido dismutasa es un importante eliminador de radicales libres de oxígeno. Como enzima medicinal, ha atraído gran atención de los círculos médicos y bioquímicos nacionales y extranjeros. La SOD puede tratar una variedad de enfermedades, como la artritis reumatoide, el infarto de miocardio, etc. , tiene efectos positivos en la protección radiológica, antienvejecimiento y antitumoral, y se utiliza ampliamente en cosméticos y aditivos alimentarios.

Desde que Mccord y Fridovich descubrieron por primera vez la superóxido dismutasa a partir de células sanguíneas bovinas en 1969, decenas de unidades de investigación científica en mi país han realizado muchas investigaciones y pruebas de producción de SOD hasta el momento, entre las cuales algunas ya están en producción en masa. La SOD ha atraído la atención de la comunidad bioquímica nacional. En 1988, se celebró la primera conferencia académica nacional de SOD en Ningbo, Zhejiang. En Kaifeng, Henan, desde abril de 1943 hasta abril de 1989, el césped figuraba como un proyecto de desarrollo clave. En la Segunda Conferencia Académica Nacional sobre SOD celebrada en Dalian en julio de 1990, la SOD se desarrolló rápidamente como enzima medicinal y se convertirá en un producto bioquímico prometedor.

La SOD es una enzima biológica ampliamente presente en animales, plantas y microorganismos. La SOD medicinal extranjera se extrae de la sangre. Mi país ha desarrollado más de 20 variedades de SOD, lo que demuestra que la investigación y aplicación de la SOD en mi país ha entrado en una nueva era.

En mi país, la SOD extraída de la sangre de ganado vacuno, equino, porcino, gallinas, perros y otros animales es rica en fuentes, de bajo costo, fácil de extraer y purificar, y la membrana celular es fácil de romper. La SOD de alta pureza se puede obtener mediante métodos convencionales de separación y purificación.

Este proceso adopta nuevas tecnologías de desnaturalización térmica y ultrafiltración, que no solo simplifica enormemente el flujo del proceso, sino que también mejora enormemente la calidad y el rendimiento del producto en comparación con el proceso anterior. La SOD extraída es CuZu-SOD.

Primero, medicamentos e instrumentos:

(1) Citrato trisódico: Na3C6H6O7 (2) Acetona industrial CaH6O

(3) Catecol La aparición del fosfato de potasio ( 4) K3Poe4

(5) intercambiador de aniones débilmente alcalino DEAE Sephadsxa-50 es dietilcelulosa de 40-120ubrd o DEAE-cell-ujose (DE-32). (6) Liofilizador (automontaje)

(7) Columna plegable (7,5 * 30 cm) (8) Centrífuga

Los reactivos anteriores y otros medicamentos e instrumentos se pueden comprar en varias provincias y ciudades Compra en tiendas de reactivos químicos y tiendas de equipos médicos.

2. Extracción y purificación de cobre y superóxido dismutasa (tomando como ejemplo sangre de vaca y sangre de caballo)

1. Proceso industrial:

Sal de lavado anticoagulante usada.

Sangre bovina fresca->glóbulos rojos->hemoglobina

Centrifugar para eliminar el plasma amarillo y añadir NaCL

Desnaturalización térmica 1 Desnaturalización térmica 2

Hematocrito->Líquido mezclado de color amarillo claro->Hematocrito;

68 grados durante 30 minutos 60-65 grados durante 20 minutos

Cromatografía con acetona más acetona

Líquido transparente azul claro -> precipitado floculante -> precipitado -> precipitado>;

liofilización

diálisis desalinización

Elución->dializado->congelación; -producto seco

2. Método de extracción

(1) Recoger glóbulos rojos: 100 litros de sangre bovina fresca, añadir 3.

Anticoagulante de citrato trisódico al 8%, revuelva uniformemente, déjelo reposar, deje que los glóbulos rojos se asienten naturalmente, retire la mayor parte del plasma superior, centrifugue el líquido inferior para eliminar el plasma restante, agregue 3 veces la cantidad de cloruro de sodio al 0,9% (refinado sal) y se lavó dos veces. El hematocrito (40 litros) se recogió mediante centrifugación.

(2) Desnaturalización térmica 1: añadir 4 kg de cloruro de sodio, 40 g de cloruro de cobre y 100 litros de agua destilada a los glóbulos rojos recogidos, agitar uniformemente y calentar a 68 grados en un baño de agua. durante 30 minutos y enfriar rápidamente a temperatura ambiente, filtrar para eliminar el precipitado y recoger el filtrado.

(3) Desnaturalización térmica 2: agregue lentamente 40 g de cloruro de cobre al filtrado en un baño de agua a temperatura constante de 65 grados hasta que el filtrado se vuelva transparente y azul claro. Manténgalo caliente durante 20 minutos. Se enfría rápidamente a temperatura ambiente. Centrifugar y tomar el sobrenadante.

(4) SOD cruda: Añadir 0,75 veces el volumen total de acetona para ultrafiltrar el sobrenadante, recoger el precipitado en el agua mediante centrifugación y eliminar la materia insoluble mediante centrifugación para obtener una solución transparente Añadir 0,75 veces. el volumen total al volumen de solución transparente de acetona, centrifugar para recoger el precipitado, lavar y deshidratar dos veces con acetona anhidra y secar al vacío para obtener SOD cruda como un polvo azul claro.

(5) Purificación de SOD cruda: disolver SOD cruda en tampón de fosfato de potasio con un valor de pH de 7,6 a 2,5 mmol/L, cargar la mezcla en una columna de 7,5*30 cm y realizar el intercambio iónico. El disolvente es DEAE-SphadexA-50 (la columna está preequilibrada con tampón), la velocidad de carga es 65.438+000 ~ 200 ml/h y se utiliza el mismo tampón A20 una vez finalizado. Recoger con un recolector parcial, dializar y desalar el eluato para obtener dializado concentrado y liofilizar para obtener el producto terminado SOD (verde claro).

3. Determinación de la actividad de la superóxido dismutasa:

Existen muchos métodos para medir la SOD, como métodos químicos, métodos de enfoque inmunoisoeléctrico, etc. El principio del método químico es que ciertos compuestos, como el pirogalol, producirán intermediarios coloreados para reducir los radicales superóxido (O2) durante el proceso de autooxidación, por lo que la SOD se puede utilizar como ejemplo. La actividad enzimática se determina evitando la acumulación de intermediarios.

1. Reactivos e instrumentos

(1) El pirocatecol es de grado analítico y se prepara en una solución de 50 mmol/L usando 10 mmol/LECL.

(2) Espectrofotómetro UV UV-754.

2. Método de determinación:

(1) Determinación de la tasa de autooxidación del pirogalol.

Añadir 10mmol/L de pirogalol a la solución tampón de 25 grados, 45ml'50m mol/L, PH 8,3, K2HPO4-KH2PO4, agitar rápidamente y verterlo en un colorímetro con un diámetro óptico de 1cm. En el plato, el valor A se mide cada 30 segundos a una longitud de onda de 325 mm y la velocidad de autooxidación se controla a 0,0700.

(2)2) Determinación de la actividad de SOD o extracto enzimático bruto:

El método de determinación es el mismo que el método de autooxidación de pirogalol. Antes de agregar pirogalol, agregue la solución de muestra de SOD que se va a analizar y calcule la actividad enzimática de acuerdo con la siguiente fórmula.

0,0700-325 mm/min

- 100 % grados.

0,70

Factor de dilución de la muestra

Actividad enzimática (U/M1) = - el volumen total de la solución de reacción.

50% del volumen de muestra

3. Concentración de proteínas (mg/ml) y cálculo de proteínas:

SOD o extracto enzimático crudo, después de una relación UV de 280 mm Para color Para la determinación, verifique la curva estándar de huevos puros y calcule la cantidad de ug de proteína por mililitro.

Concentración de proteína = ug de proteína/ml *factor de dilución de la solución de muestra * 10 menos cubo = mg de proteína/ml de proteína total = mg de proteína/ml *volumen total de la solución madre = mg de proteína.

4. Cálculo de la actividad específica (unidad/mg de proteína):

Actividad total por unidad de actividad (unidad/ml)

Actividad específica = - = u /mg de proteína.

Concentración de proteínas (mg de proteína/ml) proteína total

IV. Propiedades de la superóxido dismutasa de cobre y zinc;

1. El Cu y el Zn-SOD son de color azul verdoso, tienen un peso molecular de aproximadamente 3200 y están compuestos por un Cu y un Zn.

2. Es estable al calor. La SOD de sangre bovina natural pierde muy poca actividad enzimática cuando se calienta a 75 grados durante unos minutos.

3. El efecto del valor del pH sobre la superóxido dismutasa.

Cuando el pH está en el rango de 5,3 ~ 10,5, la velocidad catalítica de la SOD no se ve afectada. Cuando el pH es 3,6, el 95% de SODZn cae y la conformación de PH12SOD es irreducible, lo que resulta en una pérdida de actividad enzimática.

4. Características de absorción ultravioleta de la SOD: La SOD no tiene pico de absorción a 280 mm.

5. Los metales contribuyen a la actividad enzimática. La metaloenzima SOD Zn solo está relacionada con la estructura molecular y el Cu está relacionado con la actividad catalítica.

6.SOD tiene funciones de activación y desactivación.

5. Medicamentos y equipos:

Limón trisódico, grado analítico: Jiangsu Huaqiao Gongbei No. 4 Factory;

Acetona industrial: Shanghai Solvent Factory;

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Pyrogallol, grado analítico: Guizhou Zunyi Chemical Factory;

6 unidad de suscripción de SOD:

(1) No. 14, Nanyang Road, Zhengzhou, ciudad de Zhengzhou, provincia de Henan Código postal: 450053 Noticias de ciencia y tecnología de Henan 91 10 3 de octubre.

(2) Sala de recepción del Departamento de Bioquímica, Escuela Técnica de Artes y Oficios del condado de Jintang, provincia de Sichuan: 1.er piso, edificio de oficinas gubernamentales de Jintang Kou Zhun, código postal: 610404 Contacto: Deng Yong, Lipeng, Noticias rurales de Sichuan 91, 1 de marzo.

(3) No. 14, Instituto de Ciencia y Tecnología, distrito de Shangbu, ciudad de Shenzhen, provincia de Guangdong Código postal: 518031 Persona de contacto: Huang Qiulin Science and Technology News, 10 de julio de 1992,

Nota: 1, Data Institute La información de la dirección de ventas del producto adjunta está extraída de los anuncios de varias unidades en periódicos y publicaciones periódicas de los últimos dos años, con la fuente indicada.

2. Después de leer la información primero, puede realizar una pequeña cantidad de experimentos de acuerdo con su situación real, comunicarse con la unidad de compra del producto con anticipación y luego proceder a la producción en masa después de adquirir experiencia.

3. Al contactar con la unidad de compras, los lectores deben comunicarse con ellos con anticipación e incluir el envío. Después de obtener una respuesta clara, acudirán a esa persona dependiendo de la situación. No se apresure a evitar cargas financieras innecesarias.

4. Las materias primas y los instrumentos son suministrados por tiendas de materias primas en varios lugares, como Renmin South Road y Shangjiu Road en Guangzhou.

Adjunto: Información detallada sobre la recolección de césped

Fábrica farmacéutica bioquímica 1 de Guangxi Nanning

Dirección: No. 1 Luban Road

2 Shanghai. Fábrica de productos farmacéuticos bioquímicos

Dirección: No. 513, Haizhu Road

3. Fábrica de productos farmacéuticos bioquímicos de Xuzhou, provincia de Jiangsu

Dirección: No. 86 Haipei Road

4. Fábrica de productos farmacéuticos bioquímicos de Yanzhou, provincia de Shandong

Dirección: Fábrica de carne

5. Fábrica de productos farmacéuticos bioquímicos de Hunan Changde

Dirección: Fábrica de carne Dentro

6. Foshan Biochemical Pharmaceutical Factory

Dirección: Foshan

7. Guangzhou Star Pharmaceutical Factory

Dirección: Henan Road, Guangzhou Ciudad No. 48 Ye Gong Avenue North

8. Guangzhou Baiyun Pharmaceutical Factory

Dirección: Tome el autobús No. 21 en el Parque Yuexiu en Guangzhou, bájese en Sanyuanli Beizhan y camine. la Villa Mineral Spring a 200 metros.

9. Fábrica farmacéutica bioquímica de Harbin Fábrica de carne de Harbin

Dirección: No. 12 Nanji Street, Harbin Road; Tel: 88423 hasta la fábrica farmacéutica

10, Fábrica farmacéutica bioquímica de Shenyang

Dirección: No. 2 Minglian Road, distrito de Huanggu, ciudad de Harbin;

Fábrica biofarmacéutica de Nanjing 11, provincia de Jiangsu

Dirección: Nanjing, Provincia de Jiangsu, cerca del puente Baota, distrito de Xiaguan; 12, fábrica farmacéutica bioquímica de Zhejiang Jinhua

Dirección: No. 51, Hepanqiao Road, ciudad de Jinhua, provincia de Zhejiang.

13, Fábrica farmacéutica bioquímica de Guangdong

Dirección: Sanyuanli, Guangzhou

Fábrica farmacéutica bioquímica Shantou de la provincia de Guangdong 14

Dirección: Hu No 2 y 3, West Lane, Shan Road; Tel: 666124

Fábrica de productos biofarmacéuticos de Nanjing, provincia de Jiangsu 11

Dirección: cerca del puente Baota, distrito de Xiaguan, ciudad de Nanjing, provincia de Jiangsu<. /p>

12, Fábrica farmacéutica bioquímica de Zhejiang Jinhua

Dirección: No. 51, Hepanqiao Road, ciudad de Jinhua, provincia de Zhejiang.

13, Fábrica farmacéutica bioquímica de Guangdong

Dirección: Sanyuanli, Guangzhou

Fábrica farmacéutica bioquímica Shantou de la provincia de Guangdong 14

Dirección: Hu No 3, carril oeste, camino Shan, 15. Fábrica de productos químicos diarios de Shanghai Feixia.

16. Fábrica de productos químicos diarios Liyuan de Beijing

17. Fábrica de cosméticos de Nanjing

18. Fábrica de productos químicos diarios número 2 de Shanghai

19. Fábrica de cosméticos de belleza de Guangzhou

20 Segunda fábrica de productos químicos médicos de Nanjing

Fábrica de productos químicos diarios de Shanghai Yongfang

Fábrica de cosméticos de Guangzhou

Cosméticos Hangzhou Fengxi Fábrica

Fábrica de productos químicos diarios de Shanghai nº 4

Fábrica farmacéutica de Tianjin Lejin

Fábrica de productos farmacéuticos bioquímicos nº 1 de Hangzhou

Instituto de Shanghai Fábrica farmacéutica experimental de investigación médica

Fábrica de cosméticos y belleza del distrito de Tianjin Nankai

Fábrica bioquímica de Suzhou Haoxian

Fábrica farmacéutica bioquímica de Shanghai

Fábrica biomédica de Tianjin Centro de desarrollo tecnológico

Fábrica de productos de belleza Xianghai de Shanghai

Fábrica n.º 4 de productos químicos diarios de Beijing

Fábrica principal de productos farmacéuticos Wuhan Xin'andu

Fábrica farmacéutica bioquímica de Hubei Shashi

Fábrica Sanlu de Beijing

Nota: Las principales fábricas farmacéuticas, de cosméticos y salones de belleza son objetivos de ventas.

Número de contacto: 010-68150495, 68212139.

Fax: 010-68212015

Dirección: tercer piso, edificio del grupo Huadian, Wujiacun, distrito de Shijingshan, Beijing

Correspondencia: Box 40-021, distrito de Shijingshan , Pekín

Código postal:100040